移液器在质谱相关的检测中是必不可少的小仪器，其正确使用也关乎实验结果的准确与否，那如何正确使用移液器，不规范的使用又会给我们带来哪些麻烦呢，今天小编就结合自己的工作经验跟大家聊一聊移液器的使用。

一、关于移液器的规范使用

A、量程的调节一般是从大量程调到小量程，如果是小量程调到大量程，建议旋转至超过目标量程后再调至目标量程。

B、枪头的安装。垂直插入枪头，稍用力左右旋转使其固定即可，在枪头盒内使劲敲会影响移液器内部结构，影响移液器的长久使用。

C、移液方式。垂直插入液面下2-3mm，对于粘稠的或者密度较大的液体可以先润洗枪头。移液一般有两种方法，第一种是一档吸液一档打出，第二种是二档吸入后一档打出，后者适用于粘度高的液体、生物活性液体、容易起泡或者微量的液体。第一种移液方式较常用。

D、混匀速度及吸液打液速度均不易过快，避免产生气泡、飞溅等操作。

二、工作中遇到的移液器相关问题导致质谱结果出现异常的情况举例

例1临床微量元素标本检测首次结果多项偏低，后复测全部正常？

审核结果时发现20例微量元素血标本中有2例结果，其数值五六项检测结果低于正常参考区间，查看患者信息：3岁男孩，儿保门诊体检；53岁女，妇科门诊。2例均出现钙、镁、铁、锌、硒等多项指标检测结果偏低，复测两例血标本，结果恢复到正常参考区间，个别值如锌、铁在参考区间低值附近。

回顾整个实验流程，检验人员反馈，加样的大量程移液器（10mL）与枪头的适配性不太好，个别样本加完打掉的时候明显感觉枪头松动，可能导致样本加样量不足从而引起多项目数值偏低，在二次复检时未出现此类情况而结果得到纠正。

担心枪头与移液器安装不完全我们会使劲敲几下，这是很不好的习惯，可以插入枪头盒后作用旋转用力，使枪头安装密闭。尤其是大量程的移液最好确认下枪头的安装，避免带来类似的偶然误差。

例2微量元素的临床样本两位检测人员操作出现明显的系统误差，A做的5例样本均高于B的检测结果？

检查质谱的标准曲线，性能验证均通过，内标相应与标本出现相同的趋势，初步怀疑是前处理过程导致的差异，经两人详细叙述检测细节，发现A使用移液器移液的手法为一档吸样，二档打出，B为一档吸样一档打出，导致A的检测结果比B明显偏高。

作为实验室内同一试验的检验人员的比对实验，操作手法的统一是基本要求，避免人为因素导致明显的系统误差，影响检验结果的准确性，给患者的诊治及效果评价带来不必要的麻烦。

例3 AB4500MD检测雄性激素标本，个别标本出现内标响应降低的情况，仪器清洗后无明显改善？

查看内标响应强度列表，个别标本内标响应下降，相差2-3倍左右，初步怀疑仪器问题，联系AB工程师进行异常放电检测及仪器清洗。调谐中未发现异常放电，清洗过后该情况依旧偶有发生。联系试剂厂家工程师对相关问题进行追踪排查，点开内标响应数值的点状图，发现内标间隔12个出现一次较明显的降低，怀疑加内标工作液的排枪出现加样不准确导致。

经与检验人员沟通及培训后情况明显改善，考虑到样本响应与内标响应出现相同趋势的降低，对结果影响不大，未做结果追回处理；关于排枪的使用尤其是多次加样时应关注每次的液面是否整齐一致，如出现加样不足的情况应查看枪头是否松动。

例4新生儿疾病筛查串联质谱检测过程中，空白孔结果整体偏高，部分低浓度肉碱出现阳性率升高的跳值现象。

首先对样本复溶后上机检测，如果结果依然异常，很有可能是仪器方面的问题（或者仪器内部也被污染），复溶后结果正常，则很大可能是本批次实验问题。

复溶后结果正常，说明仪器状态没问题，污染应该来源于样本的处理过程，且仪器应该没有被污染。

根据工程师的意见，低浓度肉碱的污染最有可能来源于塑料制品，对前处理过程中的塑料制品进行了排查，200微升的枪头是袋装枪头人工插入枪头盒中，污染的概率最大，采用高压后的枪头与未高压的枪头进行了对比实验，结果高压后的实验空白结果明显较前明显降低，且低浓度肉碱跳值及阳性率明显降低。

为保证实验结果，前处理中的各个环节都需要进行质量控制，对于移液器及枪头，采购质量合格的耗材，进行正规且一致性的人员操作培训，是保证实验结果的重要环节。

你家质谱实验室的移液器和枪头是否存在相关的问题，赶紧去排查一下吧！

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来源|豆芽小菜

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